Abstract: Lo scopo dello studio è stato quello di selezionare coloranti idonei alla colorazione selettiva della membrana limitante interna (MLI) e delle membrane epiretiniche per utilizzo clinico. Diciannove coloranti, di cui tre di nuova sintesi, sono stati valutati per intensità e selettività di colorazione della membrana limitante interna (MLI) e facilità di eliminazione della colorazione durante la simulazione della vitrectomia, seguita da “ILM peeling”, in bulbi di maiale ex vivo. I coloranti, singoli o combinati con Trypan Blu (TB), risultati idonei alla colorazione sono stati testati per la citotossicità secondo ISO 10993-5. La combinazione dei coloranti selettivi e non citotossici è stata sottoposta a valutazione clinica nella chirurgia del pucker maculare. Solo due coloranti, Blulife e BBG250, hanno mostrato una colorazione selettiva per la MLI. Un colorante, Erioglaucine sale disodico, ha colorato sia la MLI sia la membrana ialoide (MI). Tre coloranti, Acid Violet 17, Brilliant Black and Direct Blu, hanno colorato selettivamente solo la MI. Acid Violet 17 è risultato citotossico alla concentrazione efficace. Blulife è risultato non citotossico alla concentrazione di 0,05% (p/v), mentre BBG250 è riportato come citotossico in letteratura alla concentrazione di 0,03%(p/v). L’utilizzo della miscela dei coloranti Blulife e TB nella chirurgia del pucker maculare ha confermato la visualizzazione delle membrane epiretiniche e la colorazione blu brillante, selettiva ed omogena della MLI. In particolare, nei pazienti diabetici, la colorazione selettiva della MLI ha permesso di evidenziare e successivamente rimuovere tutti i frammenti di MLI. La combinazione dei coloranti Blulife e Trypan blu permette una colorazione blu delle membrane epiretiniche e della MLI in maniera selettiva, intensa e sicura.